Руководство к практическим занятиям по биохимии. Учебное пособие для студентов специальностей «Ветеринария» и «Ветеринарно-санитарная экспертиза»
Шрифт:
Правила пользования приборами для биохимических исследований
В биохимических исследованиях фотометр используется для определения концентрации вещества в растворе по оптической плотности или коэффициенту пропускания раствора. Действие фотометра основано на том, что многие химические соединения поглощают свет в определенной спектральной области. При этом в определенных пределах концентраций величина оптической плотности раствора (то есть интенсивность поглощения света) прямо зависит от концентрации вещества в растворе. Оптическая плотность раствора определяется по формуле:
D = E l • c
D –
E – коэффициент молярной экстинкции
l – толщина кюветы
c – концентрация раствора
E – коэффициент молярной экстинкции (или молярный коэффициент поглощения) – это оптическая плотность раствора концентрацией 1 моль/л при длине светового пути (толщине кюветы) равной 1 см. Величина постоянная для каждого вещества при данной длине волны.
1 – ручка изменения длины волны излучения
2 – световое табло
3 – панель управления
4 – крышка кюветного отделения
5 – ручка перемещения кювет
6 – тумблер «Сеть»
7 – выбор режима измерения оптической плотности
8 – градуировка
9 – результаты измерения оптической плотности холостой пробы (воды)
10 – результаты измерения оптической плотности исследуемого раствора
11 – кювета (внешний вид)
1. Включите прибор в сеть. При закрытой крышке кюветного отделения включите тумблер «Сеть» (6), расположенный на боковой поверхности прибора. Тумблер загорится красным светом. В нижней половине светового табло (2) сначала появится надпись «Прогрев прибора», затем надпись «Прогрев лампы». По истечении 10 мин фотометр выдаст звуковой сигнал и на табло появится надпись «Готов к работе. Введите режим».
2. Последовательным нажатием клавиши D на панели управления (3) выберите нужный режим измерения (А – оптическая плотность), который высветится в нижней части светового табло (7).
3. Установите нужную длину волны круглой ручкой (1), находящейся слева на передней панели прибора (значение длины волны высвечивается в верхней строке светового табло). Установку длины волны необходимо выполнять подводкой со стороны
4. Промойте водой кюветы (11) и промокните их внутреннюю поверхность чистой фильтровальной бумагой. Снаружи также протрите их фильтровальной бумагой. Откройте крышку кюветного отделения (4). Налейте в кювету воду и установите ее строго вертикально в дальнее гнездо кюветодержателя. Исследуемый раствор налейте во вторую кювету и установите ее в ближнее гнездо кюветодержателя. При установке кювет нельзя касаться их рабочих поверхностей. Наличие загрязнений на рабочих поверхностях может привести к неверным результатам.
5. Ручку перемещения кювет (5) установите в крайнее левое положение.
6. Закройте крышку кюветного отделения.
7. Нажмите клавишу «#» на панели управления. В нижней части светового табло на верхней строке появится надпись «Градуировка» (8), а через 3–5 секунд надпись «Измерение». На нижней строке появится измеренное значение оптической плотности холостой пробы (воды), например «А = 0,000» (9). Оно должно составлять 0,000±0,002. Если значение А имеет большее отклонение от нуля, необходимо повторно провести градуировку (нажать «#»).
8. Ручку перемещения кювет установите вправо до упора. Через несколько секунд на нижней строке появится значение оптической плотности исследуемого раствора, например «А = 0,230» (10). Запишите полученное значение оптической плотности в рабочую тетрадь.
9. После завершения работы выключите прибор нажатием тумблера «Сеть» и отключите прибор из сети.
Термоблок предназначен для нагревания проб в пробирках и виалах в заданном температурном режиме.
ВАЖНО: прибор работает без заполнения ячеек водой. Заполнение водой опасно для жизни!
Термоблок ПЭ-4020. Общий вид.
1 – тумблер «Сеть»
2 – кнопка «Установка/работа»
3 – кнопки установки температуры
4 – ячейки для пробирок
5 – световое табло
6 – световой индикатор работы
1. Включите тумблер «Сеть» (1). Тумблер загорится красным светом.
2. Используя кнопки установки температуры (3) выставите на световом табло (5) требуемый температурный режим.
3. Нажмите кнопку «Установка/работа» (2). После этого начнется нагрев ячеек. Световой индикатор работы (6) станет мигать красно-зеленым цветом, а на световом табло высветится текущая температура в ячейках, которая будет постепенно увеличиваться, пока не достигнет заданного значения. После этого термоблок будет работать в режиме поддержания заданной температуры.