Диагностический справочник иммунолога

Полушкина Надежда Николаевна

При заболеваниях, связанных с повреждениями иммунной системы, существует необходимость оценки иммунного статуса, потребность идентифицировать нарушенное звено иммунитета для выбора метода лечения, оценки его эффективности и подбора адекватного лечения. Существует несколько вариантов оценки иммунного статуса.

При двухэтапном варианте методики на первом этапе выявляют грубые дефекты фагоцитоза, клеточного и гуморального иммунитета. Для этого определяют абсолютное и относительное содержание лимфоцитов периферической крови; Т– и В-лимфоциты, основные классы иммуноглобулинов, фагоцитарную активность.

На втором этапе проводятся аналитические тесты с включением методик определения функциональной активности фагоцитов, естественных киллеров, Т– и В-клеток.

В последующем была введена трехэтапная оценка иммунного статуса.

На первом этапе определяются

количество и морфология лимфоцитов, уровень иммуноглобулинов, производятся кожные тесты, проводится рентгенологическое обследование органов лимфатической системы.

На втором этапе проводится гистохимический анализ лимфоидных органов в проточном цитометре с использованием моноклональных антител, а также анализ цитотоксичности поверхностных маркеров мононуклеарных клеток. Третий этап включает в себя:

1) определение активности ферментов;

2) определение гормонов вилочковой железы;

3) анализ фагоцитов;

4) определение компонентов системы комплемента;

5) выявление иммунопродуцирующих фракций В-лимфоцитов;

6) проведение анализа генетических и хромосомных данных. Наиболее информативными считаются данные иммунологического обследования:

– количественная и качественная оценка иммуноглобулинов, иммунных комплексов;

– определение цитокинов;

– определение компонента комплемента;

– определение белков.

Кроме этого проводятся клеточные исследования, включающие в себя определение:

– субпопуляций лимфоцитов;

– клональности лимфоидных клеток;

– продукции иммуноглобулинов;

– функции активности лимфоцитов, тучных клеток, эозинофилов.

В последние годы широко применяется оценка В-звена иммунитета, способность В-лимфоцитов синтезировать иммуноглобулины, проводится оценка способности Т-лимфоцитов продуцировать цитокины, влияющие на макрофаги, НК-клетки.

Материалом для исследования служит сыворотка крови и клетки периферической крови. По показаниям проводятся исследования костного мозга и лимфатической системы.

В различные возрастные периоды иммунологические показатели и показатели нормального уровня лейкоцитов отличаются (табл. 4–5).

Таблица 4. Нормальное содержание лейкоцитов

Примечание. М – среднее значение; интервал – центральный диапазон; % – доля от числа белых клеток.

Таблица 5. Нормальные иммунологические показатели (из Nelson Textbok, 2003)

Схема исследования клеточного и гуморального иммунитета, факторов неспецифической защиты (табл. 6–8):

1. Исследование венозной крови (лейкоцитограмма).

2. Идентификация Т– и В-лимфоцитов методом непрямой иммунофлюоресценции в сыворотке крови.

3. Исследование методом радиальной иммунодиффузии иммуноглобулинов сыворотки крови (по методу Манчини).

4. Исследование циркулирующих иммунных комплексов осаждением в полиэтиленшкале.

5. Оценка активности фагоцитов путем определения фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа.

Таблица 6. Показатели клеточного звена иммунитета в возрасте 30–50 лет

Таблица 7. Показатели гуморального звена иммунитета в возрасте 30–50 лет

Таблица 8. Фагоцитарная активность полиморфноядерных лейкоцитов у здоровых лиц в возрасте 30–50 лет

Примечание. Фагоцитарный индекс представляет собой процент клеток, вступивших в фагоцитоз, к их общему числу. Фагоцитарное число – среднее содержание фагоцитированных частиц в одной

нейтрофильной грануле.

Часть II Болезни и расстройства иммунной системы

Глава 1 Гемолитические иммунные анемии

Гемолитические иммунные анемии возникают в результате участия антител в повреждении и преждевременной гибели эритроцитов. Антитела могут поступать извне при гемолитической болезни новорожденных, появляться после приема лекарственных препаратов, в результате бактериальных или вирусных воздействий. Антитела могут также вырабатываться против собственных неизменных эритроцитов в результате срыва иммунологических процессов.

Гемолитическая болезнь новорожденных

Гемолитическая болезнь новорожденных возникает вследствие несовместимости крови матери и плода по резус-фактору или группе крови. Болезнь развивается в тех случаях, когда во внутриутробном периоде развития эритроциты плода, попадая в организм матери, вызывают выработку антител против эритроцитов плода. Выработанные антитела, попадая в кровь плода, приводят к разрушению эритроцитов ребенка, вызывая гемолиз, развитие тяжелой гемолитической анемии.

Печень больного ребенка не может вывести из организма продукты распада эритроцитов. В результате возникают нарушения обменных процессов, что приводит к гибели печеночных клеток и повреждению клеток коры головного мозга.

На наличие гемолитической болезни новорожденных (шифр «р55» по МКБ-10) указывают определенные причины, среди которых:

– мертворождение, выкидыши, рождение детей с признаками гемолитической болезни новорожденных;

– резус несовместимости (шифр «р55.0»), когда кровь у матери резус-отрицательная, а у новорожденного резус-положительная. Антигенная структура состоит из 6 антигенов: С, с; D, d, Е, е (по Фишеру);

– (шифр «р55.1») – наличие 0 (I) группы у матери и А (II) или В (III) у ребенка. Резус положительный, эритроциты содержат Д-фактор или Rh0, резус отрицательный, эритроциты его не имеют.

В патогенезе гемолитической болезни новорожденного имеет значение проникновение в кровоток эритроцитов плода, имеющих Д-антиген, отсутствующий у матери, на который синтезируются Rh-антитела.

Rh-антитела относятся к классу JgG, они проникают через плаценту к ребенку, повреждают мембрану эритроцитов и вызывают гемолиз эритроцитов.

Антиэритроцитарные антитела могут поступать к ребенку с молоком матери.

Основные клинические симптомы

Обычно гемолитическая болезнь сопровождается окраской в желтый цвет околоплодных вод и родовой смазки.

Со стороны крови отмечается нормохромная анемия с наличием эритробластов, нормобластов, гепатоспленомегалии, отмечается также желтуха.

Заболевание может протекать в 3 формах:

– с общей водянкой;

– с выраженной анемией и желтухой;

– с умеренной анемией без желтухи.

Редкой является отечная форма, которая приводит к гибели плода во внутриутробном периоде. Часто при преждевременно наступающих родах дети погибают сразу после родов. В других случаях анемия развивается на первой или второй неделе жизни. Чаще всего встречается форма с гемолитической анемией и желтухой.

Течение заболевания обычно тяжелое. Со стороны крови определяется снижение эритроцитов, наличие молодых и юных форм, наличие эритроцитов различных размеров и форм. Определяются аутоантитела JgG класса.

Диагностика

При исследовании пуповинной крови выявляется гемоглобин ниже 166 г/л, наличие эритробластов и нормобластов более 10 на 100 лейкоцитов. Проба Кумбса положительная при резус-конфликте, отрицательная проба при конфликте по системе АВО, содержание билирубина более 51 мкмоль/л, снижение уровня белка крови до 40–50 г/л.

Лечение

Направлено на выведение резус-антител и билирубина из тканей ребенка, нормализацию органов и систем.

Для этого проводят:

– заменное переливание крови;

– фототерапию;

– дезинтоксикацию путем внутривенного введения кровезаменителей, альбумина.

Для того чтобы провести заменное переливание, в пуповинную вену вводят катетер, с помощью которого производятся эксфузия и трансфузия из расчета 150–180 мг/кг массы тела.

Процедура длится в течение 2–2,5 часов, за это время происходит вымывание билирубина и антител из тканей и кровяного русла.

Основным показателям для заменного переливания крови являются:

– прирост билирубина более 8,5 мкмоль/л;

– гемоглобин 110 г/л и меньше;

– гематокрит менее 35 %;

– концентрация билирубина более 342 мкмоль/л у доношенных и более 256 мкмоль/л у недоношенных.