250 показателей здоровья

Соловьев А. М.

Кольпоскопия . Часто при кольпоскопии можно видеть эрозии, полипы, точечные кровоизлияния в слизистую шейки матки по типу «клубника» или «укусы блох». Определяется выраженная сосудистая реакция, сосуды реагируют на уксусную кислоту. Пузырьки в выделениях за счет углекислого газа имеют примерно одинаковую величину и сине-фиолетовый цвет.

Микроскопия . У женщин материал для исследования берут из всех подозрительных участков и прежде всего – из влагалища и уретры, у мужчин – из мочеиспускательного канала. Полученный материал рекомендуется исследовать в свежем и окрашенном состоянии. Целесообразно проводить посевы на питательные среды. В неокрашенных препаратах трихомонада имеет вид грушевидного тела размером немного больше лейкоцита с характерными толчкообразными движениями. При исследовании в темном поле зрения хорошо видны жгутики. Окрашенные метиленовым синим трихомонады имеют протоплазму с ячеистым строением, эксцентрически расположенное удлиненное ядро, жгутики не видны. Хорошо определяются маленькая ротовая щель (цитостом), многочисленные пищеварительные вакуоли, наполненные заглоточным

материалом (микробами, лейкоцитами, эритроцитами, сперматозоидами). В окрашенных синью или по Граму препаратах трихомонады представляются разной величины и формы – круглые, овальные, грушевидные, контуры хорошо прорисовываются, протоплазма синего цвета или при окраске по Граму – красноватого. Ядро овальной формы, иногда с заостренными концами, сходное с косточкой сливы, расположено эксцентрически и окрашено более интенсивно, чем протоплазма.

Культуральный метод . Культивирование трихомонад не является сложным, но необходимы специальные среды, такие как Дайамонда, Купферберга. Выделения (можно использовать осадок мочи) помещаются в питательный бульон, который инкубируется. В течение 5 дней ежедневно капля среды рассматривается под микроскопом до обнаружения подвижных трихомонад. Несмотря на точность, метод культуры применяется редко.

Серологические исследования . В последние годы появились новые методы: иммуносорбция (ELISA), моноклональные антитела, латекс-агглютинация, которые определяют растворимые антигены в концентрации от 50 нг/мл. Этот метод применяется для выявления хронических форм трихомониаза, бессимптомного трихомонадоносительства. Но их недолгое использование не дает возможности окончательно говорить об их надежности.

Бактериальный вагиноз

Это патологическое состояние влагалища, обусловленное общими и местными факторами, которые привели к изменению влагалищной среды. К причинам возникновения заболевания имеют отношение анаэробные неспорогенные микроорганизмы. Синдром характеризуется появлением обильных выделений со специфическим запахом при отсутствии воспалительной реакции со стороны слизистой оболочки влагалища, при этом происходит резкое снижение количества палочек Додерлейна, которые обеспечивают подавление роста большинства болезнетворных микроорганизмов. Вследствие этого начинается размножение гарднерелл, бактероидов, пептококков. Наиболее важным этиопатологическим компонентом этого заболевания считаются гарднереллы вагиналис, впервые выделенные в 1953 г. Клинические проявления заболевания укладываются в следующую классификацию: бактериальный вагиноз, гарднереллез верхних половых путей, гарднереллез мочевых путей женщин, гарднереллез беременных, гарднереллез мочевых путей мужчин. Как правило, одновременно с гарднереллой вагиналис выделяют различные анаэробы (мобилункус, пептострептококки, бактероиды), но при этом не выделяются специфические возбудители, передаваемые половым путем. Основной симптом – обильные выделения с неприятным запахом – встречается лишь у 50 % больных. Инкубационный период заболевания составляет примерно 10 дней. Диагноз может быть установлен при наличии 3 из 4 признаков: «ключевые» клетки (более 20 %), pH влагалищной среды > 4,5, гомогенные кремообразные выделения, положительная проба с 10 %-ным КОН. Считается, что возникновение неприятного запаха обусловлено появлением патологических аминов – путресцина и кадаверина, образующихся в результате метаболизма ГВ и других неспорогенных анаэробных бактерий. Патологические амины в комплексе со щелочными растворами переходят в летучие соединения, характеризующиеся «рыбным» запахом во время половых связей и менструации, т. е. когда среда приобретает щелочную реакцию. В связи с этим проводится амиловый тест с 10 %-ным гидроксидом калия (КОН).

Кольпоскопия характеризуется отсутствием диффузной или очаговой гиперемии, точечных кровоизлияний, инфильтрации слизистой оболочки влагалища, отечности. У 27 % больных выявляются цервицит, эктропион, эктопия цилиндрического эпителия, доброкачественная зона трансформации, рубцовые деформации шейки матки.

Микроскопические методы . Проводится исследование нативного материала: окрашивание по Граму, окрашивание 0,5 %-ным водным бриллиантовым зеленым. В качестве материала для исследования используются отделяемое сводов и стенок влагалища, цервикального канала, отделяемое уретры, моча. Диагностическими критериями, присущими данному заболеванию, считают небольшое количество лейкоцитов (1–2 в поле зрения), амиловый тест, обнаружение «ключевых» клеток (более 20 %), уменьшение количества палочек Додерлейна. Особым лабораторным признаком является наличие «ключевых» клеток – это слущенные клетки влагалищного эпителия, частично или полностью покрытые грамвариабельной, но чаще – грамотрицательной флорой. На поверхности «ключевой» клетки находится большое количество прикрепленных бактерий, беспорядочно расположенных. Характерен полиморфизм бактерий: диплобациллы (чаще преобладают мелкие формы), кокки, палочки. Применяется окраска мазков по Граму. Главным разграничительным фактором становится упорядоченность расположения палочковых форм бактерий. При гарднереллезе типично резкое снижение числа лейкоцитов во влагалищном отделяемом, тогда как в цервикальном канале наблюдается лейкоцитоз. В отделяемом уретры содержание лейкоцитов нормальное. Палочки Додерлейна единичны или полностью отсутствуют. С целью типовой идентификации гарднерелл используется метод газожидкостной хроматографии.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ). Отличается высокой чувствительностью и специфичностью, превышающими культуральный метод. Однако внедрение РИФ в лабораторную практику замедляется в связи с необходимостью использования дорогих иммунных сывороток против гарднерелл.

Культуральный метод . При росте на питательной

среде гарднереллы образуют круглые гладкие колонии размером 0,5 мм. Культивирование предпочтительно проводить при повышенной концентрации углекислого газа или в анаэробных условиях. Оптимальная температура – 35–37 °C,pH – 4,5. Наиболее часто применяются среды: КДС-1 с кровью, шоколадный агар, харьковская сухая среда для выделения гонококков, вагиналис-агар, агар с лошадиной кровью, пептон-крахмал-глюкозный агар. Культуральный метод для диагностики практически не применяется, так как очень трудоемок, требует немалых материальных затрат и особых питательных сред.

ДНК-гибридизация и полимеразная цепная реакция. Методы достаточно сложные, и их использование в практической медицине нецелесообразно, так как вполне достаточно микроскопических исследований.

ВИЧ-инфекция

Возбудитель заболевания – вирус из семейства ретровирусов, и с 1986 г. называется вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ). Описаны следующие типы: ВИЧ-1, имеющий около 10 генетических субтипов, и ВИЧ-2, выделенный вначале у пациентов из Западной Африки, но на настоящий момент выделяется у больных синдромом приобретенного иммунодефицита во всем мире и HTLV–IV. Трансмиссивность ВИЧ-2 ниже, чем у ВИЧ-1, а длится заболевание медленнее. Возможно заражение больного обоими типами вируса. Жизненный цикл вируса начинается с присоединения к клетке хозяина. Поражаются клетки, имеющие на поверхности СД-4 антигенный комплекс: преимущественно Т-лимфоциты (хелперы), В-лимфоциты, промиелоциты, астроциты мозга, эпителий кишечника, моноциты/макрофаги, эндотелий капилляров. После проникания вирусной частицы внутрь клетки происходит обратная транскрипция генома вируса, его ДНК-копия проникает в ядро клетки хозяина. После этого начинается продукция вирусной ДНК, белков вируса, его «созревание» и распространение за пределы клетки хозяина. Популяция СД-4 зараженных лимфоцитов каждые 15 дней удваивается.

ВИЧ также может выявляться в плазме примерно у 30 % инфицированных, хотя и в низких количествах (от 10 до 50 частиц вируса в 1 мл). В спинномозговой жидкости число вируса ВИЧ гораздо выше – около 1000 в 1 мл. Передача заболевания происходит не через жидкостные среды, где мало свободного ВИЧ, а через зараженные клетки, которых много в секретах влагалища и шейки матки, семени и которые препятствуют борьбе с вирусом иммунной системы хозяина. С началом размножения ВИЧ-инфицированная клетка погибает, происходит слияние мембран и образование многоядерных гигантских клеток. Количество СД-4 (+) клеток уменьшается на 25–40 кл/мкл в год. Когда показатель СД-4 (+) клеток достигнет 300 кл/мкл, число вируса в крови снова возрастает, а у пациента появляется характерный симптомокомплекс заболевания – связанные с разрушением иммунитета оппортунистические инфекции и злокачественные новообразования. Больному остается до трагического конца даже при противовирусном лечении около 2 лет.

Серологические методы . Наиболее часто используется поиск антител методом иммуносорбции (ELISA). Данный метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью, но на ранних этапах инфекции антитела отсутствуют (так называемый феномен «окна»). Прогностическая ценность ELISA зависит от распространенности ВИЧ в обследуемой группе и снижается в общей популяции с невысокой частотой инфекции. При положительном результате теста следует проводить проверочные исследования (к примеру, Western blot-метод хроматографии на геле, изолирующий ВИЧ-антигены: белки сердцевины и оболочки вируса). Можно применять поиск антигенов вируса с использованием моноклональных антител. «Окно» существует только несколько недель, но иногда сохраняется до 6—14 месяцев перед сероконверсией.

ИФА . При постановке ИФА в случае положительного заключения анализ с той же сывороткой проводится еще 2 раза в той же тест-системе. При получении хотя бы еще одного положительного заключения сыворотка направляется в референс-лабораторию, где дополнительно исследуется в другой тест-системе. При получении положительного результата диагностика ВИЧ-инфекции продолжается более специфичным методом иммунного блоттинга (ИБ), позволяющим выявить антитела к отдельным белкам ретровируса. При отрицательном заключении сыворотка повторно изучается в третьей тест-системе. В данной ситуации в зависимости от результатов последнего тестирования либо выдается заключение об отсутствии антител к ВИЧ, либо сыворотка направляется на исследование в ИБ. Результаты, полученные в иммунном блоттинге, могут интерпретироваться как положительные (обнаруживаются антитела к 2 или 3 гликопротеинам возбудителя – gp41, gp120, gp160 для ВИЧ-1 и gp36, gp105, gp140 для ВИЧ-2), отрицательные (отсутствуют антитела к какому-либо антигену) и сомнительные (выявляются антитела к одному гликопротеину и (или) любым протеинам – p17, p24, p31, p51, p55, p66 для ВИЧ-1 и p18, p26, p56, p68 для ВИЧ-2). При отрицательном заключении анализа в ИБ выдается заключение об отсутствии антител к ВИЧ. При получении сомнительного результата обследуемому назначается динамическое наблюдение, а также проводятся повторные исследования на антитела к вирусу через 3 месяца и при сохранении определенных результатов – еще через 3 месяца. Если через 6 месяцев после первого обследования вновь будут получены сомнительные результаты и у пациента не будут выявлены клинико-эпидемиологические признаки ВИЧ-инфекции, то результат расценивается как ложноположительный. Только после положительного результата в ИБ возможно заключение об инфицированности лица ВИЧ.

ПЦР . Особую ценность для диагностики ВИЧ имеет ПЦР в начале болезни – еще до появления антител, когда инфицирование уже произошло, а также на поздних стадиях заболевания, когда количество антител может снижаться вплоть до полного исчезновения. Однако чувствительность метода ПЦР в целом на 1–2 % ниже, чем чувствительность ИФА. В свою очередь, это может приводить к появлению ложноотрицательных результатов. Специфичность ПЦР во многом определяется качеством используемых в наборе ингредиентов, особенно праймеров.